Naja, damit hier doch noch ein paar sinnvolle Information stehen, folgen ein paar Links auf meine derzeitige Wirkungsstätte (Max-Planck-Institut für Biochemie; Abteilung Membran- und Neurophysik) und die Technische Universität München bzw. deren Online-Bibliothek bei der man meine Dissertation (PDF-Vollversion 7,2MB) einsehen kann.
Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie an Lipidvesikeln auf oxidiertem Silizium
Die vorgestellte Arbeit zeigt die erfolgreiche Entwicklung und Anwendung eines Proben- und Meßsystems zur Untersuchung der fluiden Eigenschaften von Lipidmembranen im engen Kontakt zu einem Substrat.
Die Diffusion von fluoreszenzmarkierten Membranbausteinen wird in der Lipidmembran von stark adhärierten Riesenvesikeln mit der Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie quantitativ untersucht. Der direkte Vergleich der Kontaktmembran zur Freien Membran gestattet Aussagen über das Diffusionsmodell auf Einzelmolekülniveau und die Zahl der beweglichen Teilchen.
Die Herstellung der unilamellaren Riesenvesikel erfolgt über ein optimiertes Verfahren, welches bei Verwendung von strukturierten planaren ITO/Quarz-Elektroden eine große Ausbeute gewährleistet. In den Herstellungsprozeß integriert ist der Einbau der farbstoffmarkierten Membranbausteine.
Die Grundlagen der Diffusion in Membranen werden dargestellt und deren Repräsentation in der Korrelationsanalyse erläutert. Die Auswirkungen von reflektierendem Substrat, wie dem verwendeten oxidierten Silizium, werden in Hinblick auf das konfokale Abbildungssystem des Meßaufbaus entwickelt.
Das entwickelte Meßsystem für niedrige Farbstoffkonzentrationen gestattet die Anwendung bei unterschiedlichen Problemstellungen. Die Diffusionsuntersuchung auf Einzelmolekülniveau kann dabei sowohl in einer Standard- als auch in einer Long-Distance-Konfiguration durchgeführt werden. Die Auslegung für reflektierende oxidierte Siliziumsubstrate gestattet in Verbindung mit einer Probenrasterfunktion eine geometrische Adhäsionscharakterisierung.
Die Diffusionsuntersuchung im konfokalen Volumen erlaubt die separierte Messung in der Freien Membran und in der Kontaktmembran. Die Modelle der Normalen Diffusion in der freien und verlangsamten Anomalen Diffusion in der gestützten POPC:DOPME-Membran beschreiben die Bewegungseigenschaften der untersuchten Lipidfarbstoffe: TRITC-DHPE, DiIC18, Di-8-ANEPPS sowie des Antibiotikums Gramicidin C und des lageändernden Flip-Flop-Peptids LAH4. Das verwendete Substrat: Standard-Deckglas und oxidierte Siliziumchips mit 100nm und 2,37µm Oxiddicke sowie die Lipidzusammensetzung zeigen Auswirkungen auf das Diffusionsverhalten.